区域选择性比较强的腈水合酶资源,用起来还挺顺手的,适合搞酶催化的小伙伴参考参考。这个 2013 年的研究,是通过genome mining
挖掘出固氮菌里的hsn1
基因,再用IPTG
诱导表达得到一个Co2+
依赖的腈水合酶。嗯,表达系统用的是pETDuet-1
配BL21
,蛮常见的组合,出活性也不错。
3-(4 氯苯基)戊二腈这种底物对大部分酶来说不太好搞,但这个HSN1
对它居然有蛮好的选择性,只水解其中一个腈基,生成的3-(4 氯苯基)-4-氰基丁酰胺
还能直接一步转成巴氯芬,挺高效的。有在做小分子合成或手性中间体优化的,可以考虑套一下。
还有一点,作者用的是全细胞催化,省去了纯化酶的麻烦,工业放大也比较友好。如果你在做nitrile hydrolysis
相关的项目,这个文献真的可以拿来参考下,是底物谱扩展方向。