区域选择性比较强的腈水合酶资源,用起来还挺顺手的,适合搞酶催化的小伙伴参考参考。这个 2013 年的研究,是通过genome mining挖掘出固氮菌里的hsn1基因,再用IPTG诱导表达得到一个Co2+依赖的腈水合酶。嗯,表达系统用的是pETDuet-1BL21,蛮常见的组合,出活性也不错。

3-(4 氯苯基)戊二腈这种底物对大部分酶来说不太好搞,但这个HSN1对它居然有蛮好的选择性,只水解其中一个腈基,生成的3-(4 氯苯基)-4-氰基丁酰胺还能直接一步转成巴氯芬,挺高效的。有在做小分子合成或手性中间体优化的,可以考虑套一下。

还有一点,作者用的是全细胞催化,省去了纯化酶的麻烦,工业放大也比较友好。如果你在做nitrile hydrolysis相关的项目,这个文献真的可以拿来参考下,是底物谱扩展方向。